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            技術文章

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒實驗操作步驟@武漢賽培生物

            點擊次數:115   發布時間:2021/7/28 16:57:14

             兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒


            本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿及相關液體

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒試驗原理:

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒是采用雙抗夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)方法。

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒內容及其配制

            試劑盒成份(2-8℃保存)

            96孔配置

            48孔配置

            96/48人份酶標板

            1塊板(96T)

            半塊板(48T)

            塑料膜板蓋

            1塊

            半塊

            標準品:

            1瓶(0.6ml)

            1瓶(0.3ml)

            空白對照

            1瓶(1.0ml)

            1瓶(0.5ml)

            標準品稀釋緩沖液

            1瓶(6ml)

            1瓶(3.0ml)

            生物素標記的抗BA抗體

            1瓶(6ml)

            1瓶(3.0ml)

            親和鏈酶素-HRP

            1瓶(6ml)

            1瓶(3.0ml)

            洗滌緩沖液

            1瓶(20ml)

            1瓶(20ml)

            底物A

            1瓶(6.0ml)

            1瓶(3.0ml)

            底物B

            1瓶(6.0ml)

            1瓶(3.0ml)

            終止液

            1瓶(6.0ml)

            1瓶(3.0ml)

            標本稀釋液

            1瓶(6.0ml)

            1瓶(3.0ml)

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒自備材料

            1. 蒸餾水。

            2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

            3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒安全性

            1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

            2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

            3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒操作注意事項

            1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用恢復到室溫。稀釋過后的標準品應丟棄,不可保存。

            2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

            3. 不用的其它試劑,應包裝好或蓋好,不同批號的試劑不要混用,保質使用。

            4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

            5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

            6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

            7. 底物A易揮發,避免長時間打開蓋子,底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒,實驗完成后應立即讀取OD值。

            8. 加入試劑的順序應一致,所有反應板孔溫育的時間一樣。

            9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

            1、 血  清-----操作過程中避免任何細胞刺激,使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

            2、 血  漿----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,1000×g離心30分鐘去除顆粒。

            3、 細胞上清液--1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

            4、 組織勻漿---將組織加入適量生理鹽水搗碎,1000×g離心10分鐘,取上清液。

            5、 保  存----如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-80 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,如果血清中大量顆粒,檢測先離心或過濾,不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒試劑的準備

            1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存,稀釋將標準品振蕩混勻,稀釋比例按說明書要求進行。

            2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒操作步驟

            1. 使用,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。

            2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,每個標準品和空白孔建議做復孔,每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。

            3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體,蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

            4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次,如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

            5. 每孔加入50ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

            6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次,如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

            7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

            8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

            9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。

             

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒性能

            1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。

            2.批內與批間應分別小于9%和11%

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒保存條件:

            1. 試劑盒保存:2-8℃

            2. 效期:6個月

            3. 產品運輸:用冷藏包,優先順豐快運,確保產品安全送達。

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒48T/96T分別可以檢測多少個樣本?

            96T檢測85個樣本,剩余 的11個孔為高低濃度標準孔加1個空白對照孔。

            48T檢測37個樣本,剩余 的11個孔為高低濃度標準孔加1個空白對照孔。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒售后服務是怎么樣的?

            武漢賽培生產的試劑盒,有門的生物技術售后團隊,實驗中需要技術指導的話,可撥打公司技術線,有一對一的咨詢解答服務。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒血清血漿樣本該選用哪種真空采血管收集?

            血清:不含抗凝劑的采血管/含促凝劑采血管。(通常為紅色、黃色、橘色管蓋的采血管
            血漿:含抗凝劑采血管。(通常為綠色、紫色管蓋的采血管 )
            樣品收集后若在1周內進行檢測可保存于2-8℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(3個月內檢測),避免反復凍融。在檢測,冷凍過的樣本應緩慢地融化并離心除去凍融過程產生的沉淀物。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒代測寄樣本有什么要求?
            單純血清血漿,可以用泡沫盒子加冰袋快遞運輸,若凍存的樣本,用干冰運輸更好。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒樣本保存期限多久?

            2-8℃≤1周;  -20℃1周<t≤30天;  -80℃>30天。

             

            兔促卵泡素(fsh)ELISA試劑盒實驗設置復孔有什么好處?
            實驗設復孔個人認為有以下幾個優點:
            1.試驗中的隨機性比較大,設多個復孔可以去處部分偏差大的數據減少檢測的誤差;
            2.設置多個復孔具有統計學意義,否則很難說明數據是偶然的還是真實的;
            3.設置復孔可以避免由于主觀因素造成的誤差;
            總的來說是為了,你得到的數據更接近與真實值,避免試驗客觀和主觀誤差。

            武漢賽培生物生產的試劑盒與其它廠家的優勢在哪里?

            武漢賽培生物的試劑盒變異系數小,試劑盒穩定性更高,批間和批內重復性偏差CV值都會控制在7%以下;上萬種ELISA試劑盒指標齊全,客戶下單后交貨迅速(大部分產品在一周以內交貨);實驗室提供免費代測服務,為您節省實驗時間;公司有門技術部門提供一對一的售后服務,為您的實驗保駕護航;產品免費包郵,優先選擇順豐快運,貨物安全送達。

            原創作者:武漢賽培生物科技有限公司

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